El chile habanero (Capsicum chinense) es un cultivo de gran adaptabilidad a distintos climas y altitudes; además, es una fuente nutritiva y de compuestos alimenticios, cosmética y farmacéutica (Aguirre-Hernández y Muñoz-Ocotero, 2015). En México, su producción alcanza más de 31 000 toneladas, y Tabasco es el tercer productor nacional (SIAP, 2023). El cultivo se siembra principalmente a campo abierto (85 %), expuesto al ataque de múltiples patógenos, particularmente virus transmitidos por insectos vectores (trips, mosca blanca, áfidos, otros), por semilla o contacto mecánico (Parisi et al., 2020). Entre los virus más relevantes y presentes en México se reportan el Orthotospovirus tomatomaculae (virus de la marchitez manchada del tomate-TSWV), Cucumber mosaic virus (virus del mosaico del pepino-CMV), Alfalfa mosaic virus (virus del mosaico de la alfalfa-AMV), Orthotospovirus iridimaculaflavi (virus de la mancha del iris-IYSV) y Begomovirus capsicummusive (virus del mosaico dorado del chile-PepGMV), siendo este último propagado por Bemisia tabaci. Tan solo el Tobamovirus tabaci (virus mosaico del tabaco- TMV) genera pérdidas estimadas de 21 billones de dólares anuales en Estados Unidos (Miller, 2024). El Comité Internacional de Taxonomía de Virus (ICTV) reconoce cuatro géneros de la familia Geminiviridae: Mastrevirus, Topocuvirus, Curtovirus y Begomovirus (Fauquet et al., 2008). Los Begomovirus destacan por su diversidad, transmisión por especies de mosca blanca y capacidad para infectar plantas dicotiledóneas. Su genoma puede ser monopartito o bipartito (Argüello et al., 1994; Gutiérrez et al., 2004; Gafni y Epel, 2002). Se han descrito más de 200 especies del género Begomovirus (King et al., 2012). Estos virus inducen síntomas de mosaicos, clorosis, deformaciones y enanismo, y están considerados en uno de los grupos de patógenos vegetales más importantes a nivel

mundial.

En México, las pérdidas por enfermedades virales en cultivos oscilan entre el 20 y el 100 % (Anaya-López et al., 2003). Incluso sin síntomas visibles, las virosis reducen significativamente la productividad de las plantas, afectando tanto el tamaño como el número de frutos (Hull, 2014). Dado el impacto de las enfermedades virales en la producción de chile habanero en México (Arguello et al., 2003), resulta esencial identificar con precisión los agentes causales y conocer su incidencia en distintos cultivares. En Tabasco no se cuenta con reportes previos sobre la detección especifica de virus, ni del reconocimiento de síntomas asociados. Por ello, el objetivo de este trabajo fue detectar agentes virales causantes de enfermedades con sintomatología característica de virosis mediante técnicas serológicas y moleculares, en cuatro cultivares de chile habanero de Tabasco y determinar su incidencia y rendimiento bajo condiciones de campo.

Área de estudio. La investigación se realizó en Arroyo Hondo Abejonal, Cárdenas, Tabasco, con clima cálido-húmedo tropical (Am(g)w), temperaturas promedio de 26 °C y lluvias abundantes en verano y una sequía prolongada a partir de marzo. Por su fisiografía, en una llanura aluvial que se compone por sedimentos del Cuaternario reciente (Palma- López et al., 2007).

Material vegetal. Se evaluaron cuatro cultivares de chile habanero: Jaguar, Orange, Palenque F1 y PX-11459057. Para su establecimiento se utilizaron plántulas de 45 días de edad y 15 cm de altura, provenientes del vivero Barbosa (Muna, Yucatán).

Diseño experimental. Se estableció el bioensayo (13 de febrero de 2024) para observar el comportamiento fitosanitario y productivo de cuatro cultivares de chile habanero. El experimento se realizó en un diseño completamente al azar con cuatro tratamientos (cultivares) y cuatro repeticiones. Las parcelas experimentales estaban constituidas de cuatro surcos de 15 m, cada uno separado 1.5 m entre surcos. La siembra de plantas estuvo a una distancia 0.5 m, utilizando como parcela útil los dos surcos centrales de 13 m (52 plantas c/u).

Manejo agronómico. Se empleó acolchado plástico y fertirriego por goteo con la fórmula 218-196-180 kg ha-1 de NPK (López-López et al., 2018). No se aplicaron insecticidas durante el ciclo, con el propósito de tener infestación de mosquitas blancas para una inoculación natural de virosis. Solo se hizo una aplicación inicial para control de insectos defoliadores. Además, se utilizaron fungicidas y bactericidas de forma preventiva para evitar la presencia de otros tipos de enfermedades.

Detección de virus por pruebas serológicas con ImmunoStrips®. Se realizaron 64 pruebas rápidas en plantas sintomáticas para detectar los virus TSWV, CMV, AMV e IYSV siguiendo las indicaciones de manual del fabricante. Se maceró el tejido foliar de fragmentos de cinco hojas sintomáticas tomadas de la parte superior de distintas plantas (0.15 g por muestra) en 3 mL de la solución buffer del kit (Agdia Inc) hasta obtener un extracto homogéneo. Luego, se insertó la tira ImmunoStrip® en el extracto, dejándola a temperatura ambiente (30 °C) durante 10 a 20 minutos.

Detección de Begomovirus por PCR. Se colectaron muestras foliares compuestas de 10 hojas sintomáticas de la zona apical de cada cultivar. Las muestras se enviaron a procesar al laboratorio de BioCiencia S.A. de C.V. (Monterrey, N.L.). La extracción de ADN se realizó con el método Plant DNAzol®. Para la detección de Begomovirus emplearon los iniciadores prV-324/prC-889, dirigidos al gen cp de la cápside (Wyatt y Brown, 1996). Las amplificaciones por PCR se efectuaron en un volumen de 25 µL, con los cebadores prV- 324/PrC-889 (fragmentos de 509 a 565 bp) y los productos fueron visualizados mediante electroforesis en gel de agarosa al 1 %. La secuenciación de los fragmentos amplificados, en ambos sentidos, se realizó en el laboratorio Psomagen (Maryland, EE. UU.). Las secuencias obtenidas fueron comparadas con accesiones depositadas en el GenBank del NCBI, mediante el sistema BLAST.

Descripción de síntomas virales e incidencia de plantas sintomáticas. Se registró el porcentaje de incidencia en cinco tiempos: a los 28, 49, 71, 94 y 113 días después del trasplante (ddt). Para lo cual se cuantificó el número de plantas con síntomas virales entre el total de plantas de la parcela útil. Así mismo, se documentaron los síntomas observados en el follaje, flores, fruto y el aspecto general de las plantas.

Tamaños, color y producción de frutos. Se midieron diámetro y longitud de 40 frutos, por cultivar mediante el empleo de un vernier digital (marca ENVR), se documentó las variaciones en el color típico del fruto en cada cultivar, antes de la madurez fisiológica. Se empleó la escala establecida en la guía técnica para la descripción varietal de chile habanero (SAGARPA y SNICS, 2014) para determinar su tamaño y color. Se obtuvo el promedio del peso de los frutos del chile cosechados, de las cuatro parcelas útiles de cada cultivar. La producción se expresó en kg de chile /planta y se estimó el rendimiento.

Análisis estadístico. Se verificaron los supuestos de normalidad y homogeneidad de varianza (Lidman, 1974). Los datos de incidencia (%) se transformaron mediante la función arco seno √X, antes del ANOVA. Se realizó el ANOVA de los datos experimentales del diseño completamente al azar y las medias se compararon con la prueba de Tukey (p ≤ 0.05) utilizando el software Statgraphics Plus 5.1 para Windows (Polhemus, 1980).

Detección de virus con InmunoStrips® en plántulas y plantas en campo. Las pruebas ImmunoStrips® realizadas fueron negativas para los cuatro virus analizados (TSWV, CMV, AMV e IYSV) en los cuatro cultivares (Cuadro 1). Estos virus probablemente no estuvieron presentes durante el análisis y los síntomas foliares no son atribuibles a tales virus. Estas pruebas serológicas, no necesariamente cuestiona la sensibilidad reconocidas por su eficacia en la detección de virus (Vásquez-Gutiérrez et al., 2024), lo que sugiere la presencia de otros virus no detectables por los inmunoStrips utilizados (Agdia EMEA, 2024). Chew-Medinaveitia et al. (1995) registró datos similares en C. annuum con resultados serológicos negativos en plantas con síntomas virales evidentes como los de este estudio.

Detección de virus por PCR. Los cultivares Palenque F1, PX-11459057 y Jaguar presentaron amplicones de 545, 509 y 565 bp, respectivamente. En el análisis de secuencias por BLAST se observó una identidad que osciló de 98.35 a 99.02 % correspondientes a Begomovirus capsicummusive (Virus mosaico dorado del chile-PepGMV) (Cuadro 1). Por lo que se considera que los síntomas observados en chile habanero en Cárdenas, Tabasco, están asociados a la presencia de B. capsicummusive, un begomovirus de importancia económica. El virus se encontró en tres de los cuatro cultivares de chile habanero (Palenque F1, Jaguar y PX-11459057), lo cual representa el primer reporte para Tabasco. Esta detección está en concordancia con lo reportado por Gracia-Medrano et al. (2022) en Yucatán, donde se identificó PepGMV en más del 90 % de las muestras de Capsicum chinense. Los síntomas observados como mosaicos, clorosis intervenal, enchinamiento y deformación foliar fueron consistentes con infecciones por PepGMV (Brown et al., 2005; Lozano-Durán et al., 2011).

Cuadro 1

Tratamiento	Cultivar	Begomovirus (PCR)	Accesión	Porcentaje de similitud (%)	Especie de viral
1	Palenque Fi	Positivo	HE967533	98.35	Begomovirus
2	Jagual	Positivo	HE967533	99.02	capsicummusive Begomovirus
3	Orange	Negativo	-	-	capsicummusive -
4	PX-11459057	Positivo	LN848769	98.53	Begomovirus capsicummusive

Nota. N/D= No detectado

El cultivar Orange fue negativo por PCR a Begomovirus, esto podría atribuirse a una baja carga viral en las muestras (González-Garza, 2017; Morales et al., 2017) o sintomatología asociado a otros virus. Se sugiere complementar el diagnóstico convencional con técnicas de preamplificación como la amplificación circular (RCA) para mejorar la sensibilidad (Morales et al., 2017; Sánchez et al., 2021) y el análisis molecular para otros géneros de virus asociados a los síntomas.

Síntomas virales. Previo al trasplante, las plantas de las cuatro variedades no mostraban síntomas virales. A los 31 ddt, se observaron síntomas foliares de clorosis intervenal en hojas nuevas de la zona apical de las plantas, mosaicos foliares, enrollamiento, enchinamiento y así como reducción del tamaño de hojas nuevas (Figuras 1 A, B, C, D y E). A los 69 ddt, el número de plantas enfermas aumentó, y se detectó reducción de la lámina foliar y el enanismo de la planta; además, caída de botones florales (Figuras 1 F y I). A los 125 ddt, además de los daños anteriores, se registraron deformaciones y reducción en el tamaño de los frutos (Figuras 1 G y H). En el cultivar Palenque F1, se observaron frutos con pérdida de color verde, adquiriendo tonos pálidos (Figura 1 G).

Figura 1

Incidencia virus. La incidencia de plantas de chile habanero con síntomas virales fue directamente proporcional a la edad del cultivo (Figura 2). A los 28 ddt, los cultivares Jaguar (3 %) y Orange (1 %) mostraron síntomas iniciales de virosis. A los 49 ddt, durante la etapa de floración, la incidencia estuvo entre 3 y 14 %. En la etapa inicial de fructificación (71 ddt) la incidencia se elevó a 24 % en Jaguar y Orange. A los 94 ddt, en etapa productiva, las incidencias fueron mayores en: Jaguar (61 %), Orange (54 %) y Palenque F1 (48 %), mientras que el cultivar PX-11459057 solo presentaba el 25 %. Finalmente, a los 113 ddt, todos los cultivares presentaban incidencia por arriba del 95 %, y afectaciones en el tamaño de frutos.

Figura 2 Nota. ET=Error típico, d= días.

Los resultados muestran un patrón ascendente del porcentaje de incidencia conforme avanzó el ciclo fenológico de los cultivares para los cuatro cultivares. Este patrón coincide con lo descrito por Mejía-Teniente et al. (2015), quienes reportaron incrementos sostenidos de plantas enfermas con síntomas virales de Begomovirus capsicummusivi-PepGMV y de Begomovirus capsicumhuastecoense-PHYVV en chile habanero, bajo condiciones de campo en Yucatán. En esta investigación, no se hizo el manejo de moscas blancas, que pudo favorecer la alta dispersión viral (Brown et al., 2005; Villa-Castorena et al., 2014).

Rendimiento de frutos. La Figura 3 ilustra las medias de producción por corte (Kg de frutos planta-1) de los cultivares Palenque F1, Jaguar, Orange y PX-11459057. El análisis de varianza del promedio de la producción acumulada de seis cortes de chile por planta, mostró diferencias significativas (p < 0.05) en el rendimiento de frutos (Cuadro 2). Los cultivares Jaguar y Orange mostraron presencia viral desde muy temprana edad, manifestando daños sobre la constitución de las plantas y la producción. Palenque F1 y PX- 11459057 presentaron síntomas más tardíos y con menor impacto en la producción (Cuadro 2). La producción promedio de frutos fue de 0.23 y 0.10 kg por planta para los cultivares Jaguar y Orange, respectivamente. En el cultivar Palenque F1 se tuvo un rendimiento de 0.93 kg por planta y el valor más alto para el cultivar PX-11459057 con 1.41 kg por planta. PX-11459057 mostró una menor incidencia de plantas con síntomas virales en etapas tempranas, lo que se expresó en mayor rendimiento acumulado (18.92 t ha-1), muy por encima de los rendimientos de los cultivares Jaguar y Orange.

Cuadro 2

Cultivar	Producción promedio (kg por planta)	Rendimiento estimado (t ha-1)
Palenque F1	0.93 b	12.51 b
Jaguar	0.23 a	3.09 a
Orange	0.10 a	1.38 a
PX-11459057	1.41 c	18.92 c

Calidad de frutos. Se observaron diferencias significativas en el diámetro de los frutos entre cultivares (p< 0.05), pero no en longitud (p> 0.05). De acuerdo a la escala de descripción de variedades de chile habanero de SAGARPA, SNICS (2014) todos los frutos se clasificaron como pequeños (Cuadro 3). En todos los cultivares, el tamaño de los frutos fue menor al potencial genético reportado, lo cual se puede atribuir a la asociación de síntomas virales de Begomovirus capsicummusive que impactó el tamaño y coloración del fruto. El daño por virus también podría ser el responsable de la reducción del color verde intenso típico en algunos de los cultivares, como Palenque F1.

Cuadro 3

Cultivar	Diámetro (cm)	Escala diámetro fruto (SAGARPA, SNICS, 2014)	Longitud (cm)	Escala longitud fruto (SAGARPA, SNICS, 2014)
Palenque F1	2.87 b	Pequeño	4.1 a	Corto
Jaguar	2.81 b	Pequeño	3.6 a	Corto
Orange	2.45 a	Pequeño	3.8 a	Corto
PX-11459057	2.98 b	Pequeño	4.1 a	Corto

Todos los cultivares mostraron dimensiones y peso por debajo de los valores potenciales reportados para los cultivares Palenque F1, Jaguar, Orange y PX-11459057 (Ramírez- Meraz el al., 2018; López-López et al., 2018; Agromora, 2021; Bayer, 2024). Este tipo de afectaciones morfológicas ha sido señalado para Geminivirus en Capsicum spp., donde se ha demostrado que las proteínas virales interfieren con la señalización hormonal de auxinas y giberelinas, afectando la arquitectura de la planta y desarrollo del fruto (Ascencio-Ibáñez et al., 2008). Desde el punto de vista agronómico, la reducción en el rendimiento y tamaño de los frutos puede ser atribuible a la asociación del Begomovirus capsicummusive lo que compromete la rentabilidad del cultivo, comparado con los máximos rendimientos reportados por Ramírez-Meraz et al. (2018), bajo manejo intensivo, produciendo más de 30 t ha-1 para Jaguar y hasta 32.5 t ha-1 y en otros híbridos de acuerdo con Ramírez y Méndez-Aguilar (2020). Estos resultados refuerzan la necesidad de realizar un diagnóstico preciso sobre los virus presentes en Tabasco, que permitan proponer un manejo integrado con cultivares con tolerancia genética, protección de plántulas en etapa temprana y manejo efectivo del vector (Lapidot y Friedmann, 2002; Velásquez-Valle et al., 2014).

Se confirmó la asociación de Begomovirus capsicummusive (PepGMV) en tres de los cuatro cultivares evaluados (Palenque F1, Jaguar y PX11459057) mediante pruebas de PCR. La incidencia de plantas con síntomas virales (superior al 95 %) se podría asociar con el bajo rendimiento (0.1 a 1.4 kg ha-1) y tamaño pequeño de frutos de chile habanero en Tabasco. El cultivar PX-11459057 registró una incidencia tardía a los 94 ddt (25 %), lo que favoreció en el mayor rendimiento del cultivo (1.41 kg ha-1).