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Patogenicidad, agresividad y carga de inóculo inducidos por dos haplotipos-ITS de Neopestalotiopsis rosae, aislados de fresa (Fragaria x ananassa) y zarzamora (Rubus sp.)
por Citlalmina Erandy Montes Hernández, Gustavo Mora Aguilera*, María Elizabeth Morales Cortés, Gerardo Acevedo Sánchez, Ángel López Zárate
*Autor de Correspondencia.
Recibido: 14/junio/2024 – Publicado:
31/diciembre/2025
DOI:
https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2406-5
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Resumen Antecedentes/Objetivo. En fresa (Fragaria x ananassa), principal frutilla-rosácea en México, se reportó recientemente en Michoacán la ocurrencia de Neopestalotiopsis rosae (Ascomycota: Sporocadaceae). El objetivo fue analizar, con un enfoque etiológico-epidemiológico, la implicación de dos haplotipos-ITS de N. rosae, asociados a cinco aislados de fresa y zarzamora (Rubus sp.) seleccionados por prevalencia regional, en la patogénesis, agresividad y carga de inóculo en fresa cv. San Andreas.
Materiales y Métodos. Tres aislados del Haplotipo 1 / Fresa (H1): F142P40S, F6P35R, F17P34R, y dos del Haplotipo 2 (H2) / Zarzamora: F142D93R y Z13P27R se cultivaron en V8 / 25° / 14 d hasta conidiomas, y en PDA / 25° / 7 d para obtención de inóculo líquido y sólido, respectivamente. Por aislado se evaluaron ochos plantas de fresa cv. San Andreas de tres meses de edad; se inocularon dos hojas trifoliadas / 4 plantas con 4 mL aspersión 1 x 106 conidios mL-1, y 4 plantas con bloques de micelio 5 x 5 mm por herida en corona. En 8 plantas testigo se asperjó agua estéril. Las plantas se mantuvieron en invernadero semicubierto. A partir de 72 hdi, cada 3 d / 3 meses se midió: Número de lesiones (NL), Diámetro de lesión (DL), Núm. Lesiones esporulantes (LE), Altura planta, Diámetro de corona, y Unidades clorofila SPAD 502 (UC). Por Haplotipo se estimó el Periodo de Incubación (Pi), Periodo de Latencia (Pl), y Periodo de Generación (Pg). Cada 30 min se registró T° y HR con HOBO U23. La patogenicidad de validó con postulados de Koch. Los reaislados H1 y H2 se confirmaron culturalmente y por ITS1/ITS4. ANOVA, en Parcelas Divididas, y Tukey (p = 0.05) se ejecutó en RStudio.
Resultados. Los cinco aislados de N. rosae fueron más infectivos en hoja (p = 0.0001), pero exhibieron agresividad variable y significativa (p = 0.0001) en NL, LE, y DL, con expresión de lesiones foliares circulares de color café claro, borde oscuro y halo rojizo en haz y envés. Aislados de H1 fueron más patogénicos respecto a H2 (p.e. 3504 vs 270 NL / planta), siendo H1 - F142P40S más agresivo (p = 0.05), con promedio de NL = 187.5 y LE = 8.45 a 2 y 26 días después de la inoculación (ddi), respectivamente. En contraste, H2 - F142D93R y H2 – Z13P27R tuvieron NL = 20 y 25 a 87 y 95 ddi, respectivamente, con máximo rango promedio de 0.19 - 0.37 LE > 73 ddi. Análogamente, en corona todos los aislamientos fueron patogénicos, pero con menor agresividad y sin diferencia estadística. Se presentó coloración rojiza - oscura y pudrición necrótica interna en corona y menor densidad de raíz. Sobresalió H1 - F17P34R con máximo NL = 20 y LE < 0.1 a 85 ddi. En hoja, la velocidad de expresión sintomática y tasa de esporulación, aunque variable, fue mayor en aislados H1 vs H2, determinados, respectivamente, por 2 vs 4 ddi Pi, 14 -16 (3 d) vs 33 – 40 (7 d) ddi Pl, y 14 – 73 (59 d) vs 33 – 56 (23 d) ddi Pg. La infección en corona fue más lenta con 28 d Pi con ambos haplotipos. La agresividad contrastante entre aislados no tuvo efecto significativo en altura - planta y diámetro – corona, pero sí en reducción de UC con máximo de 14.5 en H1 - F142P40S respecto al testigo. ITS de 33 reaislados permitieron confirmar la patogenicidad de H1 y H2.
Conclusión. A través de NL, LE, UC, Pi, Pl, y Pg, significativamente contratantes, se demostró la variabilidad patogénica de dos haplotipos-ITS de N. rosae prevalentes en Michoacán obtenidos de fresa y zarzamora. Se aborda una novel comprensión mecanística de la patogénesis, y se reporta por primera vez a N. rosae asociado a zarzamora con capacidad patogénica en fresa, pero con menor agresividad. Un manejo regional sostenible debe considerar la capacidad variable del hongo y la interacción con otros patógenos con capacidad vascular.
Palabras clave: Berries, Unidades Clorofila, Periodo de incubación, Periodo de latencia, Fisiología
Cuadro 1. Promedio de Unidades clorofila (UC), altura de planta y diámetro de corona en plantas de fresa cv. San Andreas inoculadas por aspersión y herida con cinco aislados de N. rosae.
Figura 1. Expresión de lesiones y lesiones esporulantes en hoja de fresa cv. San Andreas inoculadas por aspersión con aislados de N. rosae. A y B. NL y LE a 21 días después de la inoculación (ddi) con F142P40S. C y D. Número de lesiones (NL) y Lesiones esporulantes (LE) a 77 ddi con el aislado Z13P27R E. Testigo absoluto, F. Conidioma de N. rosae en PDA.
Figura 2. Corte longitudinal de corona de plantas de fresa cv. San Andreas a los 115 ddi inoculadas con N. rosae, F142P40S (H1) y F142D93R (H2). En inoculación por herida (B), H1 causó necrosis total. La corona muestra predominantemente cambios en la coloración de café claro a café oscuro-rojizo. En plantas testigo no se detectó cambio de coloración.
Figura 3. Progreso de lesión en lámina foliar de plantas de fresa cv. San Andreas inoculadas por aspersión con cinco aislados de N. rosae correspondientes del haplotipo H1 y H2 a los 2, 19, 40, 63 y 95 ddi. Los guiones representan pérdida de las hojas por deterioro total del tejido causado por la agresividad asociada a cada aislado. Por ejemplo, en F6P35R la perdida de hojas se alcanza en 40 ddi.
Figura 4. Análisis de varianza (Tukey, p < 0.05) en parcelas divididas, donde parcela grande es el método de inoculación y la parcela chica el aislado para las variables número de lesiones (A) y lesiones esporulantes (B). Letras diferentes muestran diferencias significativas con α = 0.05.
Figura 5. Dinámica de número de lesiones (NL) y lesiones esporulantes (LE) en hojas de fresa cv. San Andreas hasta 95 días por aspersión con cinco aislados de N. rosae obtenidos de fresa (F) y zarzamora (Z), A. Promedio absoluto de NL y LE de tres aislados del Haplotipo 1 (H1). B. Promedio absoluto de NL y LE en dos aislados del Haplotipo 2 (H2), C. Asociación de HR y T °C con el comportamiento del hongo sobre tejido hasta 100 días D. Estimación de periodo de incubación (Pi), periodo de latencia (Pl) y periodo de generación (Pg) por haplotipo de N. rosae.
Figura 6. Dinámica de lesiones (NL) y lesiones esporulantes (LE) en hoja hasta 95 ddi por herida en corona con cinco aislados de N. rosae obtenidos de fresa (F) y zarzamora (Z), A. Promedio absoluto de NL y LE de tres aislados del H1, B. Promedio absoluto de NL y LE de dos aislados del H2, C. Asociación de HR y T °C con el comportamiento del hongo sobre tejido hasta 100 días, D. Estimación de periodo de incubación (Pi), periodo de latencia (Pl) y periodo de generación (Pg) por haplotipo de N. rosae.
