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Caracterización morfológica y molecular de cepas de Trichoderma aisladas del biofertilizante BioHumisol®
por Karla Marina Báez Parra, Edith Salazar Villa, Josefina León Félix, Miguel Ángel Angulo Escalante, Indira Rojo Báez*
*Autor de Correspondencia.
Recibido: 28/julio/2024 – Publicado:
16/diciembre/2025
DOI:
https://doi.org/10.18781/R.MEX.FIT.2407-3
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Resumen Antecedentes/Objetivo. Existen biofertilizantes, que contienen microorganismos benéficos para la planta y el ambiente. Sin embargo, algunos productos comerciales proporcionan poca información de las especies que emplean en sus productos; por lo que este trabajo tuvo el objetivo de identificar cultural, morfológica, morfométrica y molecularmente las especies de Trichoderma presentes en el biofertilizante BioHumisol® de uso agrícola en Culiacán y Navolato, Sinaloa, México.
Desarrollo experimental. A partir del biofertilizante líquido BioHumisol® se aislaron y purificaron colonias fúngicas. Para la identificación cultural, morfológica y morfométrica se emplearon tres cajas Petri con crecimiento fúngico por aislado, se registraron las características de color, forma del micelio y disposición en el medio de cultivo, días de esporulación, tamaño y forma de conidios, fiálides y clamidosporas. Además, se registró la tasa de crecimiento micelial. A nivel molecular se amplificó la región ITS y el gen TEF-1 α, las secuencias se registraron en GenBank con los números de acceso: PP956784, PP956785 para ITS; PP968400, PP968399 para TEF-1 α, y se realizó el análisis filogenético de las secuencias concatenadas mediante el método de máxima verosimilitud e inferencia Bayesiana con un bootstrap de 1000 réplicas.
Resultados. Las colonias fúngicas presentaron conidióforos hialinos, ramificados, no verticilados; fiálides simples o en grupos con ramificaciones terminales con medidas promedio de 4.1-6.2 × 9.7-15.3 μm; conidios unicelulares, ovoides con medidas promedio de 3.6-5.09 × 3.27-6.41 μm y clamidosporas subglobosas intercalares y terminales cuyo tamaño fue de 21.41 × 21.72 μm, lo que coincide con Trichoderma. Actualmente, para una correcta identificación se requiere la caracterización cultural, morfológica, morfométrica completada con la caracterización molecular. El análisis BLAST de las secuencias parciales de ITS mostraron una homología del 99 % y del gen TEF -1 α una homología del 100 % con T. asperellum, el análisis filogenético confirma cercanía genética con especies del clado Viride.
Conclusión. De acuerdo con la caracterización cultural, morfológica, morfométrica y molecular la especie que se encuentra en el biofertilizante líquido BioHumisol® es Trichoderma asperellum.
Palabras clave: Trichoderma asperellum, ITS, TEF -1 α, Biocontrol
Cuadro 1. Especies y números de acceso de GenBank correspondientes de las secuencias utilizadas en el análisis filogenético.
Figura 1. Morfología de aislamientos de Trichoderma asperellum. A) Caja Petri con siete días de crecimiento en PDA-AL a) anverso, b) reverso; B-D) Conidióforos con fiálides y conidios en racimos; E) Hifas y conidios y F) clamidosporas.
Figura 2. Árbol filogenético basado en secuencias parciales concatenadas de ITS y TEF 1-α de especies de Trichoderma. El árbol se construyó utilizando el método máxima verosimilitud e inferencia Bayesiana con 1000 réplicas, las probabilidades posteriores bayesianas (PP>0.5) y valores de Bootstrap (BS>50) se muestras en los nodos. Las secuencias de este estudio se encuentran en negrita. Como grupo externo se utilizó Fusarium oxysporum (número de acceso GenBank: OR734798 y ON316841).
